當前,傳統(tǒng)的微藻細胞學檢測方法主要包括:?MTT/WST法、免疫熒光檢測、質(zhì)譜分析、流式細胞術(shù)、高內(nèi)涵分析等,這些檢測形式多是終點檢測法,僅給實驗提供一個最終結(jié)果,無法實現(xiàn)全程微藻細胞動態(tài)信息采集;而且大部分需要標記和破壞細胞。
然而,科技在進步,技術(shù)在革新!隨著電子技術(shù)在生物學研究領(lǐng)域的拓展應(yīng)用,傳感器阻抗技術(shù)在微藻細胞分析中的應(yīng)用具有其特有的優(yōu)勢,使得目前的微藻細胞分析檢測技術(shù)正走向?qū)崟r無標記全自動的發(fā)展時代!
什么是RTCA?
RTCA,即實時無標記細胞分析技術(shù)。(Real Time Cellular Analysis,RTCA)
該技術(shù)采用特殊工藝,將微電子細胞傳感器芯片整合到表面適于微藻細胞貼附與生長的細胞檢測板的底部或細胞浸潤遷移板的微孔膜,用以構(gòu)建實時、動態(tài)、定量跟蹤微藻細胞形態(tài)和增殖分化等改變的細胞阻抗檢測傳感系統(tǒng)。當貼壁生長在微電極表面的微藻細胞引起貼壁電極界面阻抗的改變時,這種改變與微藻細胞的實時功能狀態(tài)改變成相關(guān)性,通過實時動態(tài)的電極阻抗檢測可以獲得微藻細胞生理功能相關(guān)的生物信息,包括細胞生長、伸展、形態(tài)變化、浸潤及遷移、死亡和貼壁等。
RTCA檢測原理
RTCA應(yīng)用領(lǐng)域
(一)微藻細胞增殖檢測
(二)化合物及細胞因子介導(dǎo)的細胞毒作用
(三)細胞遷移及浸潤檢測
(四)細胞質(zhì)量控制
(五)細胞粘附及伸展檢測
(六)受體介導(dǎo)的信號通路檢測
(七)細胞與細胞相互作用(共培養(yǎng))
(八)病毒介導(dǎo)的細胞病變(病毒CPE)檢測
(九)NK細胞介導(dǎo)的細胞殺傷作用檢測
(十)藥物篩選應(yīng)用
(十一)藥物心肌細胞毒性檢測
RTCA技術(shù)優(yōu)勢
1、無需標記
(1)可以節(jié)約因標記帶來的時間和花費
(2)不改變研究對象的性狀,使研究過程更為簡便及實現(xiàn)自動化
(3)不需要知道明確的作用靶點,可實現(xiàn)多功能的檢測?
2、實時動態(tài)監(jiān)測
(1)高質(zhì)量、更多的信息量
(2)動態(tài)實時檢測及數(shù)據(jù)收集?
3、持續(xù)的細胞質(zhì)控
(1)保證實驗細胞質(zhì)量?
4、非創(chuàng)傷性的檢測
(1)更接近生理狀態(tài)
(2)檢測后的細胞還可用于其他的檢測方法?
5、準確性高,可針對不同通量檢測