光照，是影響微藻生長(zhǎng)的最重要環(huán)境因子之一。它對(duì)微藻的生長(zhǎng)、繁殖、藻體顏色、細(xì)胞形態(tài)及胞外多糖積聚都有著重要的影響。
在這場(chǎng)無(wú)聲的對(duì)話中，光照就像是微藻的“指揮家”，引導(dǎo)著它們的生命節(jié)奏。當(dāng)光照充足時(shí)，微藻會(huì)充分吸收陽(yáng)光中的能量，進(jìn)行光合作用，將二氧化碳和水轉(zhuǎn)化為生物質(zhì)和氧氣。在這個(gè)過程中，微藻會(huì)合成各種蛋白質(zhì)、脂肪和碳水化合物，為自身的生長(zhǎng)和繁殖提供所需的營(yíng)養(yǎng)。
然而，光照并不是越多越好。當(dāng)光照強(qiáng)度過高時(shí)，微藻可能會(huì)受到光抑制，導(dǎo)致光合作用效率下降，甚至?xí)?duì)其生長(zhǎng)和生存造成不利影響。此外，光照時(shí)間和光照周期也會(huì)對(duì)微藻的生長(zhǎng)和代謝產(chǎn)生影響。不同的微藻對(duì)光照的需求和適應(yīng)能力也有所不同，有些微藻喜歡強(qiáng)光環(huán)境，而有些微藻則更適應(yīng)弱光環(huán)境。
除了光照，溫度、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和其他環(huán)境因素也會(huì)對(duì)微藻的生長(zhǎng)和代謝產(chǎn)生影響。因此，在培養(yǎng)微藻時(shí)，需要綜合考慮這些因素，為微藻提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。
總之，微藻與光照之間的關(guān)系是微妙而復(fù)雜的。了解光照對(duì)微藻的影響，對(duì)于我們更好地利用微藻資源、保護(hù)環(huán)境、開發(fā)新的生物技術(shù)等方面都具有重要的意義。讓我們不再誤解“藻”，而是通過深入研究和探索，更好地與它們進(jìn)行這場(chǎng)無(wú)聲的對(duì)話。
如果您想了解更多的藻知識(shí)，請(qǐng)聯(lián)系我們。我們是一家做藻及光反應(yīng)器的公司。做藻，我們是認(rèn)真的！
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微藻能夠通過光合作用吸收水中的二氧化碳，并將其轉(zhuǎn)化為有機(jī)物，從而降低水中的碳含量。同時(shí)，它們還能攝取水中的氮、磷等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，有效減少水體的富營(yíng)養(yǎng)化現(xiàn)象。微藻的生長(zhǎng)過程如同一場(chǎng)無(wú)聲的凈化盛宴，將污水中的污染物逐漸轉(zhuǎn)化為自身的營(yíng)養(yǎng)成分，實(shí)現(xiàn)了對(duì)污水的深度凈化。
此外，微藻還能產(chǎn)生多種有益物質(zhì)，如抗氧化劑、多糖等，進(jìn)一步提升了凈化效果和水質(zhì)的品質(zhì)。
微藻對(duì)市政污水廠二級(jí)出水的凈化作用，不僅為我們提供了一種綠色、可持續(xù)的污水處理方式，也讓我們看到了大自然的神奇力量。讓我們更加深地了解和利用微藻的凈化能力，為保護(hù)水資源、改善環(huán)境質(zhì)量貢獻(xiàn)出我們的力量。
相信在不久的將來(lái)，“藻知道”的故事將在更多的地方被傳頌，微藻將在環(huán)保事業(yè)中綻放出更加耀眼的光芒。
參考文獻(xiàn)：
解清杰,姜姍,管向偉,等.基于小球藻的淺層藻床反應(yīng)器對(duì)市政污水廠二級(jí)出水的凈化效果[J].江蘇大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2024,45(03):367-372.
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這項(xiàng)由美國(guó)自然歷史博物館、哥倫比亞大學(xué)和亞利桑那大學(xué)的科學(xué)家們領(lǐng)導(dǎo)的研究發(fā)現(xiàn)，五種單細(xì)胞綠藻在“饑餓”的時(shí)候會(huì)吃掉細(xì)菌，而且只在這些細(xì)菌還活著的時(shí)候才吃。這項(xiàng)研究今天發(fā)表在《ISME》雜志上。
“傳統(tǒng)上，我們認(rèn)為綠藻是純粹光合作用的有機(jī)體，通過在陽(yáng)光下浸泡生產(chǎn)它們的食物，”美國(guó)自然歷史博物館副館長(zhǎng)、該研究的論文通訊作者之一Eunsoo Kim指出，“但我們已經(jīng)了解到，在條件適宜的情況下，有許多種綠藻也可以吃掉細(xì)菌。另外我們還發(fā)現(xiàn)，作為進(jìn)食者它們是多么得挑剔。”
2013年，Kim和她的同事們首次提供了綠藻以細(xì)菌為食的確鑿證據(jù)，他們?cè)谝环N產(chǎn)自明胞菌屬的藻類中證明了這一點(diǎn)。雖然該領(lǐng)域的一些人認(rèn)為這種行為是罕見的例外，但Kim的實(shí)驗(yàn)室繼續(xù)探索混合營(yíng)養(yǎng)是否也存在于其他類型的綠藻中。在哥倫比亞大學(xué)拉蒙特-多爾蒂地球觀測(cè)站的研究生Nicholas Bock和博物館博士后Sophie Charvet領(lǐng)導(dǎo)的研究小組提出一種新的實(shí)驗(yàn)方法之前，這是一種很難證實(shí)的行為。
研究人員使用一種無(wú)毒熒光染料標(biāo)記的活細(xì)菌進(jìn)行了喂食實(shí)驗(yàn)，并將這些細(xì)菌跟五種不同的單細(xì)胞綠藻–被叫做prasinophytes–結(jié)合，然后通過流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析。據(jù)悉，流式細(xì)胞儀可以幫助科學(xué)家分析溶液中的細(xì)胞特性。流式細(xì)胞儀檢測(cè)到隨著時(shí)間的推移，藻類細(xì)胞中的綠色熒光水平不斷增加，這表明藻類正在吞噬發(fā)光的細(xì)菌。為了確認(rèn)確實(shí)發(fā)生了吞食，研究人員使用了高精度顯微鏡來(lái)確定綠色熒光從海藻細(xì)胞內(nèi)部發(fā)出。在這個(gè)過程中，研究小組發(fā)現(xiàn)了這些挑食者的兩個(gè)特別的怪癖：他們測(cè)試的藻類只吃活細(xì)菌（實(shí)驗(yàn)中死亡的細(xì)菌沒有被碰過），當(dāng)其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量較低時(shí)，它們吃得更多。這些發(fā)現(xiàn)對(duì)綠藻的環(huán)境研究具有重大意義。
“傳統(tǒng)上，當(dāng)人們研究海洋中的藻類對(duì)環(huán)境樣本的細(xì)菌攝食時(shí)，他們使用熒光標(biāo)記的細(xì)菌，這些細(xì)菌在標(biāo)記過程中被殺死，”Charvet說(shuō)道，“至少在我們培養(yǎng)的五種藻類菌株中，它們優(yōu)先以活細(xì)菌為食，而似乎忽略了被殺死的細(xì)菌。這意味著，由于所使用的方法，藻類對(duì)自然環(huán)境中細(xì)菌群落的影響可能被嚴(yán)重低估了?！?/span>
綠藻遍布世界各地并幫助形成了水生食物網(wǎng)的基礎(chǔ)。跟其他光合作用的有機(jī)體如藍(lán)藻、硅藻和甲藻–它們有一個(gè)總稱浮游植物–一起，綠藻起到了某種生物碳泵的作用，其消耗二氧化碳的規(guī)模相當(dāng)于陸地生態(tài)系統(tǒng)中的樹木和其他陸地植物。
Bock說(shuō)道：“幾十年來(lái)，科學(xué)家們已經(jīng)能夠發(fā)射衛(wèi)星并通過測(cè)量葉綠素獲得光學(xué)數(shù)據(jù)來(lái)推斷全球浮游植物的分布。通過研究，我們已經(jīng)了解到浮游植物對(duì)碳循環(huán)至關(guān)重要。這里的假設(shè)是所有的葉綠素只是代表光合作用。這不能解釋混合營(yíng)養(yǎng)的部分，因?yàn)闆]有簡(jiǎn)單的方法來(lái)檢測(cè)它們是否在吃其他細(xì)胞。我們的研究強(qiáng)調(diào)，實(shí)際情況要復(fù)雜得多?！?/span>
在Bock和Charvet領(lǐng)導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)的同時(shí)，研究人員利用美國(guó)自然歷史博物館和畢格羅海洋科學(xué)實(shí)驗(yàn)室的John Burns建立的基于基因的預(yù)測(cè)模型來(lái)研究綠藻吃細(xì)菌。這些預(yù)測(cè)跟實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致，并表明這種行為在綠藻生命樹中更為普遍。
The post 研究發(fā)現(xiàn)饑餓的綠藻更喜歡吃活細(xì)菌 first appeared on 上海光語(yǔ)生物科技有限公司.]]>光合細(xì)菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的運(yùn)用非常廣泛，是凈水、調(diào)水的小能手。光合細(xì)菌可以降解水體中的有機(jī)物，如魚蝦殘餌、糞便等，可以吸收水中的有害物質(zhì)，如氨氮、亞硝酸鹽、硫化氫等。水產(chǎn)養(yǎng)殖中長(zhǎng)期使用光合細(xì)菌，可以有效避免有害物質(zhì)沉積，減少魚蝦生病的機(jī)率，提高魚蝦產(chǎn)量。
現(xiàn)在我們來(lái)介紹下，養(yǎng)殖戶如何自己培育光合細(xì)菌？
養(yǎng)殖戶自己培育光合細(xì)菌不僅使用效果好，而且成本還很低！
我們以培育100公斤光合細(xì)菌為例，需要以下原料：光語(yǔ)光合細(xì)菌培養(yǎng)基1袋；光合細(xì)菌菌種20公斤；清潔水80公斤，另備一個(gè)能盛裝100公斤液體的塑料桶。
具體培育方法：
首先將1袋光合細(xì)菌培養(yǎng)基溶入清潔水中，包括光合細(xì)菌培養(yǎng)基中的“小袋”原料也要加入。
然后加入20公斤光合細(xì)菌菌種，攪拌均勻后分裝入魚苗袋或塑料膜袋中。
影響光合細(xì)菌培育速度的主要因素是環(huán)境溫度、光照，通常經(jīng)過4-15天時(shí)間就培育成功了。培育好的光合細(xì)菌pH值在8以上，顏色為紫紅色，略帶濃稠度，味道偏臭。
對(duì)于有經(jīng)驗(yàn)的培育者，批量培育，相對(duì)更粗放。
2019年由浙江省海洋水產(chǎn)養(yǎng)殖研究所肖國(guó)強(qiáng)研究員，蔡景波高級(jí)工程師等負(fù)責(zé)的浙江省省級(jí)重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目“重要漁業(yè)水域生態(tài)容量評(píng)估及生態(tài)修復(fù)關(guān)鍵技術(shù)-海水池塘養(yǎng)殖容量及生態(tài)修復(fù)關(guān)鍵技術(shù)研究”，旨在解決海水池塘養(yǎng)殖的生態(tài)修復(fù)問題。樂清光語(yǔ)生物科技有限公司參與其中的塘口高活性海水微生物，菌藻培養(yǎng)的光生物反應(yīng)器設(shè)計(jì)和制造。
2020年，項(xiàng)目組認(rèn)為穩(wěn)定優(yōu)勢(shì)高活性的微生物生態(tài)系統(tǒng)對(duì)于海水池塘的生態(tài)穩(wěn)定性至關(guān)重要，研究人員付諸實(shí)踐，設(shè)計(jì)了用海水池塘原水經(jīng)過簡(jiǎn)單砂濾后加上培養(yǎng)基和菌種，藻種直接培養(yǎng)微生物的技術(shù)，簡(jiǎn)單可行，老百姓容易掌握。
原有海水池塘長(zhǎng)期受到如下問題困擾：
1、亞硝酸鹽受到天氣影響，常年在0.3-1.1mg/L；
2、溶氧不穩(wěn)定，白天5-8mg/L，晚上1-3mg/L；
3、養(yǎng)殖品種魚腥味很大；
4、水質(zhì)渾濁，影響藻類光合作用
光語(yǔ)生物按照設(shè)計(jì)為試驗(yàn)示范塘提供4套100L前置柱狀光生物反應(yīng)器和1套2600L的管道式光生物反應(yīng)器。利用前置光生物反應(yīng)器擴(kuò)培需要的光合細(xì)菌或者有益藻類，達(dá)到一定濃度后，接種到2600L的管道式光生物反應(yīng)器里，利用自然光進(jìn)行光合培養(yǎng)。在3-5天后達(dá)到高濃度后均勻釋放到100畝的池塘里。
經(jīng)過1-2次潑灑，水質(zhì)在7-10天后明顯變化，亞硝酸鹽降到0.1mg/L，溶氧穩(wěn)定在5-7mg/L，水質(zhì)清爽，養(yǎng)殖品種魚腥味減少，賣相變好。唯一的問題是目前滸苔數(shù)量增多，需要人工打撈。
后期光語(yǔ)生物將協(xié)助項(xiàng)目組完成其他設(shè)施的制造和完善，并為養(yǎng)殖戶提供培養(yǎng)基和菌種，藻種支持。
The post 海水池塘養(yǎng)殖容量及生態(tài)修復(fù)關(guān)鍵技術(shù)研究進(jìn)展 first appeared on 上海光語(yǔ)生物科技有限公司.]]>光語(yǔ)生物科技有限公司積累了8年的光生物反應(yīng)器制作技術(shù)，為客戶提供多種不同場(chǎng)合的管道式光生物反應(yīng)器生產(chǎn)光合細(xì)菌的解決方案，既可以為客戶提供物美價(jià)廉的光生物反應(yīng)器培養(yǎng)光合細(xì)菌方案，同時(shí)又可以提供一些簡(jiǎn)易的培養(yǎng)設(shè)備。
同時(shí)光語(yǔ)又是一家光合細(xì)菌菌種和技術(shù)服務(wù)提供商，不單單為客戶提供光合細(xì)菌培養(yǎng)用的光生物反應(yīng)器，還可以為客戶提供生產(chǎn)穩(wěn)定，繁殖迅速的優(yōu)質(zhì)菌種和培養(yǎng)技術(shù)，保證客戶買得起設(shè)備，培養(yǎng)光合細(xì)菌成功，不會(huì)出現(xiàn)設(shè)備買了養(yǎng)不起來(lái)光合細(xì)菌的情況，還可以為客戶單位的技術(shù)工程師提供培訓(xùn)服務(wù)。
光語(yǔ)專門研發(fā)了光合細(xì)菌適用的LED光源，代替已經(jīng)淘汰的白熾燈，實(shí)現(xiàn)光合細(xì)菌訂單式工廠化生產(chǎn)，縮短光合細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)間到3-7天。
LED的光照強(qiáng)度可以達(dá)到1000μE（μmol/m2/s，相當(dāng)于10萬(wàn)lux的大陽(yáng)光強(qiáng)度）
光合細(xì)菌最高濃度可以達(dá)到吸光度OD=3.4，平均OD=1.4-2左右。
本期（2018年4月5日）在線發(fā)表的兩篇Nature長(zhǎng)文分別報(bào)道了高分辨率的反應(yīng)中心和天線的超級(jí)復(fù)合體結(jié)構(gòu)（LH1-RC）2,3。這是繼2014年日本茨城大學(xué)王征宇團(tuán)隊(duì)與合作者解析了紫色光合細(xì)菌Thermochromatiumtepidum晶體結(jié)構(gòu)（Niwa?et al?2014）之后4，此研究領(lǐng)域迎來(lái)的終極突破。日本岡山大學(xué)沈建仁團(tuán)隊(duì)與王征宇團(tuán)隊(duì)合作再次將Tch.Tepidum的LH1-RC晶體分辨率提高到1.9埃。此高分辨率晶體結(jié)構(gòu)揭示了LH1-RC蛋白和多種輔因子更加清晰的精細(xì)結(jié)構(gòu)，與1988年諾獎(jiǎng)的反應(yīng)中心結(jié)構(gòu)相比，此超級(jí)復(fù)合體結(jié)構(gòu)描繪了反應(yīng)中心結(jié)合外圍天線的狀態(tài)，描述了中心與天線（16組α和β亞基對(duì)）的結(jié)合方式（圖1），以及天線復(fù)合體中鈣離子的準(zhǔn)確位置和結(jié)合環(huán)境。也對(duì)醌轉(zhuǎn)移單子的路徑和機(jī)制進(jìn)行了描述。
同時(shí)，英國(guó)謝菲爾德大學(xué)的Hunter教授團(tuán)隊(duì)通過冷凍電鏡技術(shù)對(duì)Blastochloris?viridis的LH1-RC復(fù)合體進(jìn)行了結(jié)構(gòu)解析，分辨率為2.9埃。此紫色光合細(xì)菌即是當(dāng)年獲諾貝爾獎(jiǎng)的菌株，Tch.tepidum為其“兄弟”。相比于Tch.Tepidum，Bch. viridis的LH1-RC復(fù)合體外圍共17對(duì)α和β亞基，而且多了一圈γ亞基（16個(gè)）。缺失的一個(gè)γ亞基剛好作為醌轉(zhuǎn)移單子的通道，而且在復(fù)合體內(nèi)部完美地發(fā)現(xiàn)了Qp的口袋位點(diǎn)（圖2）。這兩個(gè)long-awaited高分辨率LH1-RC結(jié)構(gòu)，在時(shí)隔三十年以后，為掀起膜蛋白結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究熱潮的光合紫細(xì)菌反應(yīng)中心的結(jié)構(gòu)研究畫上了完美句號(hào)。
雖然國(guó)內(nèi)在高等植物和紅藻的光合蛋白結(jié)構(gòu)解析方面領(lǐng)先世界，但關(guān)于光合細(xì)菌的研究工作還開展較少。而很多光合細(xì)菌是出自火山和熱泉眾多的島國(guó)日本，風(fēng)行于歐美，但參與這兩項(xiàng)主要工作的第一作者都是國(guó)人，錢樸博士致力于此項(xiàng)研究已逾二十載，于龍江博士也是2014年晶體結(jié)構(gòu)的主要完成人之一。沈建仁教授和王征宇教授更是在光合作用研究領(lǐng)域的國(guó)際知名專家，更是華人科學(xué)界的驕傲！
Refer：
1???? Deisenhofer,J., Epp, O., Miki, K., Huber, R. & Michel, H. Structure Of the ProteinSubunits In the Photosynthetic Reaction Center Of Rhodopseudomonas-Viridis at3a Resolution. Nature 318, 618-624 (1985).
2???? Yu, L.-J.,Suga, M., Wang-Otomo, Z.-Y. & Shen, J.-R. Structure of photosyntheticLH1–RC supercomplex at 1.9 ? resolution. Nature, doi:10.1038/s41586-018-0002-9(2018).
3???? Qian, P.,Siebert, C. A., Wang, P., Canniffe, D. P. & Hunter, C. N. Cryo-EM structureof the Blastochloris viridis LH1–RC complex at 2.9 ?. Nature,doi:10.1038/s41586-018-0014-5 (2018).
4???? Niwa, S. etal. Structure of the LH1-RC complex from Thermochromatium tepidum at 3.0 A.Nature 508, 228-232, doi:10.1038/nature13197 (2014).
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國(guó)內(nèi)常見微生物檢驗(yàn)所用的菌種代號(hào)是：
CMCC（F）或 CMCC（B）
CMCC-中國(guó)醫(yī)學(xué)菌種保藏中心
B-代表細(xì)菌，F(xiàn)-代表真菌。
大腸桿菌[CMCC(B)44102]；
乙型副傷寒沙門桿菌[CMCC (B) 50094]；
銅綠假單胞菌[CMCC (B)10104]；
金黃色葡萄球菌[CMCC (B)26003]；
生孢梭菌[CMCC(B)64941]；
白色念珠菌[CMCC(F)98001]
根據(jù)微生物的菌種生理、生化特性，在人工創(chuàng)造的條件下盡量降低微生物細(xì)胞的代謝強(qiáng)度，使細(xì)胞基本處于休眠狀態(tài)，生長(zhǎng)繁殖受到抑制但又不至于死亡，以減低菌種的變異率。低溫、干燥、缺氧、缺乏營(yíng)養(yǎng)等環(huán)境條件都有抑制微生物的代謝作用。
低溫、干燥、真空是用于菌種保藏的重要手段。
※選擇保藏方法時(shí)，首先應(yīng)考慮方法能否長(zhǎng)期地保持菌種原有的特性，同時(shí)也應(yīng)兼顧到方法的經(jīng)濟(jì)和簡(jiǎn)便。在實(shí)際工作中，往往多種條件同時(shí)使用，以提高保藏效果。
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（二）菌種保藏步驟
①挑選特征典型的純菌菌落；
②確定保藏的合適菌體形態(tài)；
③選擇最適宜的保藏方法；
④定期對(duì)保藏菌種進(jìn)行檢查，觀察是否發(fā)生變化，若有變化，須改變保藏方法，保藏期滿應(yīng)及時(shí)進(jìn)行移種；
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? 1.瓊脂斜面低溫保存法
（1）方法：
將經(jīng)常使用的菌種的典型菌落接種在斜面（某些特殊菌種可用液體培養(yǎng)基）上，按規(guī)定的溫度和時(shí)間培養(yǎng)，待充分生長(zhǎng)后，把培養(yǎng)好的新鮮菌種用牛皮紙保好，為減緩培養(yǎng)基的水分蒸發(fā)，延長(zhǎng)保藏時(shí)間，可將菌種保藏管的棉花塞換成橡膠塞。放在4℃左右的冰箱中保藏。每隔 2~3個(gè)月移種一次，繼續(xù)進(jìn)行保藏。若用半固體高層培養(yǎng)基穿刺培養(yǎng)，一般可保藏半年——一年。有的甚至更長(zhǎng)時(shí)間。
（2）適用范圍：
細(xì)菌、酵母菌、霉菌保藏。? ?
（3）特點(diǎn)：
優(yōu)點(diǎn)是——簡(jiǎn)便，易于推廣；一般不需要另選擇保藏用培養(yǎng)基；對(duì)大多數(shù)微生物都適用；
缺點(diǎn)是——保藏期太短；傳代次數(shù)多，易發(fā)生變異及污染。? ?
（4）注意事項(xiàng)：
保藏的菌種應(yīng)是生命活力旺盛的新鮮培養(yǎng)物，至少應(yīng)是第三代的培養(yǎng)物。
保藏時(shí)，破傷風(fēng)桿菌可用庖肉培養(yǎng)基；生孢梭菌用流體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基。必須定期檢查保藏菌種冰箱的溫度、濕度以及菌種管的棉塞是否松動(dòng)或生霉，如有異常應(yīng)及時(shí)處理。
每次移植后，應(yīng)與原菌種的編號(hào)、名稱逐一核對(duì)，確證培養(yǎng)基特征和純度無(wú)誤后再繼續(xù)保藏。
保藏菌種的培養(yǎng)基應(yīng)無(wú)糖，其他菌類含糖小于2 %為宜，以免產(chǎn)酸過多，影響菌種存活。
銅綠假單胞菌在冰箱中易發(fā)生菌體自溶而死亡，不宜用本法保存。
?2.液體石蠟保存法：
本法是用石蠟將培養(yǎng)物與空氣隔絕，以降低菌種的生理生化水平，并可防止水分蒸發(fā)，從而延長(zhǎng)菌種的保藏期：
（1）方法：
將菌種接種于斜面或穿刺于0.3~0.5 %瓊脂半固體高層培養(yǎng)基中，培養(yǎng)好備用。取化學(xué)純的液體石蠟裝在試管中，每管10~15mL，加棉塞，瓶口包上紙，121℃高壓滅菌30min，取出置37℃溫箱或110~ 170℃烤箱中1 ~ 2h或干燥器內(nèi)除去液體石蠟中的水分。
將上述液體石蠟加入培養(yǎng)好的菌種試管內(nèi)，液體石蠟液面以高出培養(yǎng)基最上端1㎝為宜，將試管直立，放入4℃冰箱中保藏。
（2）適用范圍：適用于保藏部分霉菌，酵母菌和放線菌，對(duì)細(xì)菌保藏效果較差。? ??
（3）特點(diǎn)：本方法簡(jiǎn)便易行，是實(shí)驗(yàn)室常用的一種保藏方法，該法主要使菌種與空氣隔絕。??
（4）注意事項(xiàng)：
①保藏時(shí)，用新鮮培養(yǎng)物接種，應(yīng)檢查純度和特征后，方可進(jìn)行保藏；
②保藏過程中，需經(jīng)常觀察斜面是否干燥，如干燥，需重新移種；
③使用菌種時(shí)，先將菌種管傾斜使液體石蠟流至一邊，再用接種針挑取培養(yǎng)物接種到新鮮斜面上培養(yǎng)，待長(zhǎng)出新培養(yǎng)物后，再移種一次到新斜面上即可使用；
④將沾有少量液體石蠟的接種針浸于95%酒精中片刻，再燒灼滅菌，以免直接在酒精燈下燒灼時(shí)，液體石蠟四濺，引起污染；
⑤液體石蠟在菌種管中高出培養(yǎng)基的高度要嚴(yán)格控制，如太多，會(huì)影響菌種交換氣體，使保藏效果不好；如太少，斜面容易干燥，將縮短保藏期。一般以高出斜面1cm為宜；
⑥制備無(wú)菌液體石蠟時(shí)，每管裝量不能太多，否則分裝到菌種培養(yǎng)基中易造成污染。
1.菌種的復(fù)蘇
把凍干菌種管、滅菌1mL滴管、雙碟、鑷子、營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面數(shù)支，移入超凈工作臺(tái)或生物安全柜。
先用砂輪將凍干菌種安瓶頸部挫出刻痕，再將凍干菌種管外壁用碘酒擦洗消毒、稍干，用75%乙醇棉擦凈，放在滅菌雙碟內(nèi)，待干。點(diǎn)燃酒精燈，將菌種管的封口一端在火焰上，燒灼紅熱，用滅菌滴管吸取營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，滴在灼熱的菌種管封口一端，使驟冷而炸裂。
取滅菌鑷子，在火焰旁，將炸裂的管口打開，放入滅菌雙碟內(nèi)，另取1支滅菌滴管，在火焰旁吸取營(yíng)養(yǎng)肉湯少許，加至菌種管底部，將凍干菌攪動(dòng)促使溶解，隨即吸出管內(nèi)菌液，分別接種至營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面及普通肉湯內(nèi)，并將滴管及菌種管投入消毒液內(nèi)，將已接種的營(yíng)養(yǎng)肉湯及營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面置35~37℃培養(yǎng)22~24h。
取出培養(yǎng)物，仔細(xì)觀察菌苔形態(tài)、有無(wú)雜菌、涂片、革蘭氏染色鏡檢，呈典型菌落后，轉(zhuǎn)種3代即可應(yīng)用。如發(fā)現(xiàn)菌型不典型，可進(jìn)行平板分離單菌落。
2.菌種的傳代與保存
方法1：菌斜面（保存）
培養(yǎng)基應(yīng)新鮮制備，如斜面已無(wú)冷凝水者，不宜再使用。標(biāo)簽上注明菌名及接種日期。
至冰箱取出的菌種斜面，應(yīng)在室溫放置約30分鐘，待溫度平衡后再移入接種室或超凈工作臺(tái)。
點(diǎn)燃酒精燈，用左手握住菌種斜面，將管口靠進(jìn)火焰旁，右手拿接種棒后端，將接種環(huán)燒紅30秒，隨后將全部接種棒金屬部分在火焰上燒灼，往返通過3次。左手將管口在火焰上旋轉(zhuǎn)燒灼，右手用無(wú)名指、小指及掌部夾住棉塞，撥開棉塞，將接種環(huán)伸人管內(nèi)先在近壁的瓊脂斜面上靠一下，稍冷卻再移至菌苔上，刮去少量菌苔，隨即取出接種棒，并將菌種管口移至火焰旁。
堵上棉塞，左手將菌種管放下，取營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面1支，照上述操作打開棉塞，將接種環(huán)伸入管內(nèi)至瓊脂斜面的低部，由底向上，將接種環(huán)輕貼斜面的表面曲折移動(dòng)，使細(xì)菌劃在斜面的表面上。
取出接種棒，在火焰旁將培養(yǎng)基管棉塞堵上，然后將接種過細(xì)菌的接種棒在火焰上燒灼滅菌。
將已接種畢的細(xì)菌管置35~37℃培養(yǎng)22~24小時(shí)，霉菌管一般置20~25℃霉菌培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)7日。取出后放人冰箱保存，一般 3個(gè)月轉(zhuǎn)種一次。
方法2：菌斜面-營(yíng)養(yǎng)肉湯-分離平板-菌斜面
如果菌落形態(tài)不典型可純化，按下列方法傳代（分離菌落）：用接種環(huán)取上述菌管（斜面）菌苔少許接種置營(yíng)養(yǎng)肉湯中(5mL/支，已滅菌)，置35~37℃培養(yǎng)18~24小時(shí)后，再用接種環(huán)取培養(yǎng)好的營(yíng)養(yǎng)肉湯菌懸液（濃菌液），接種于分離平板，置35~37℃培養(yǎng)18~24小時(shí)，用接種針選典型菌落劃線于營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面，置35~37℃培養(yǎng)18~24小時(shí)。一般同時(shí)接種幾支管，其中一支用于以后菌種傳代或接種到半固體瓊脂培養(yǎng)基中，其它用做工作菌種。
常用分離平板：
大腸埃希菌——EMB瓊脂平板；
銅綠假單胞菌——溴化十六烷三甲銨瓊脂培養(yǎng)基；
金黃色葡萄球菌——甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基。
3.菌懸液的制備
取上述培養(yǎng)好的菌種斜面移入超凈工作臺(tái)或生物安全柜，放置室溫后，用接種環(huán)取菌苔少許接種置營(yíng)養(yǎng)肉湯中(5mL/支，已滅菌), 將已接種畢的細(xì)菌管置35~37℃培養(yǎng)18~24小時(shí)，取出備用。
一般于冰箱中保存可用7天。
4.對(duì)照用菌液制備
取上述培養(yǎng)好的營(yíng)養(yǎng)肉湯菌懸液（濃菌液1mL，加到9mL，0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液混勻，為10-1，再取另一只吸管吸取10-1菌液1mL加到9mL，0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液混勻，為10-2……
以此類推，稀釋至含活菌數(shù)在50 ~ 100個(gè)。用平板計(jì)數(shù)。
此稀釋菌液用于試驗(yàn)后加陽(yáng)性對(duì)照，可在1天內(nèi)使用。
5.菌種保管
菌種保管應(yīng)有專人負(fù)責(zé)，保存與加鎖的冰箱中或特制的白鐵箱中加鎖置陰暗處，確保菌種安全。因工作變動(dòng)時(shí)，必須做好交接工作。菌種應(yīng)有詳細(xì)登記本，包括名稱、分離日期、鑒定日期、鑒定者、主要鑒定性能，并注意記錄使用、轉(zhuǎn)移及銷毀情況和原因。各種菌種應(yīng)按規(guī)定時(shí)間定期移種。一般每移種3次后作一次全面鑒定。注意菌種有無(wú)污染和變異，如，發(fā)現(xiàn)污染和變異時(shí)，應(yīng)及時(shí)更換。購(gòu)置菌種，應(yīng)有介紹信。全部保存菌種應(yīng)具備清單，并定期向部門負(fù)責(zé)人報(bào)告。
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小結(jié)
菌種保藏方法種類繁多，如何在眾多方法中挑選出最適合自己的？也不好說(shuō)，這還得因?qū)嶒?yàn)而異！
(文章來(lái)源：食品實(shí)驗(yàn)室服務(wù))
The post 【實(shí)驗(yàn)室】菌種代號(hào)的意義、菌種傳代與保存方法匯總！ first appeared on 上海光語(yǔ)生物科技有限公司.]]>張光明，中國(guó)人民大學(xué)環(huán)境學(xué)院教授，博士生導(dǎo)師。美國(guó)Purdue University環(huán)境工程博士?；粲|教育基金會(huì)高等院校青年教師獎(jiǎng)獲得者，新世紀(jì)優(yōu)秀人才支持計(jì)劃人選。先后承擔(dān)并參與了十余項(xiàng)國(guó)家項(xiàng)目，其中包括國(guó)家自然科學(xué)基金3項(xiàng)。曾獲黑龍江省技術(shù)發(fā)明一等獎(jiǎng)。發(fā)表論文150余篇，其中SCI收錄論文98篇，EI收錄論文87篇，著作5本，獲得發(fā)明專利13項(xiàng)。
有機(jī)廢水生物轉(zhuǎn)化理論
2015年，全國(guó)廢水產(chǎn)量達(dá)到738億噸。廢水中的主要污染物包括有機(jī)物(COD)、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(N、P)、有毒有害物質(zhì)(重金屬、POPs)、鹽等。目前對(duì)于廢水的處理工藝包括生物、化學(xué)、物理三種方法，其中生物法使用最多，占比90%。
生物處理技術(shù)可以利用微生物(活性污泥)新陳代謝，將廢水中的有機(jī)物、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、部分難降解有機(jī)物分解成CO2、N2、水。但同時(shí)微生物合成自身物質(zhì)，會(huì)形成更多微生物(剩余污泥)。這也是污水生物處理中一個(gè)不可避免的問題。
生物轉(zhuǎn)化是上個(gè)世紀(jì)四五十年代提出的一種理論。以無(wú)毒無(wú)害的營(yíng)養(yǎng)型廢水作為培養(yǎng)基，利用其中的有機(jī)物、N、P等物質(zhì)培養(yǎng)具有回收價(jià)值的微生物，同時(shí)去除了廢水中的COD、N、P。
目前國(guó)際上生物轉(zhuǎn)化技術(shù)，利用最多的是光合細(xì)菌。轉(zhuǎn)化途徑如下圖：
光合細(xì)菌介紹
光合細(xì)菌是一類進(jìn)行不放氧光合作用的微生物，是地球最古老的生命之一。
光合細(xì)菌代謝途徑靈活，包括光合作用、呼吸作用、發(fā)酵。同時(shí)，可以利用有機(jī)物、硫化物、氨各種基質(zhì)作為供氫體兼碳源。
我國(guó)自上世紀(jì)八十年代開始，南開大學(xué)、清華大學(xué)、上海交通大學(xué)、中科院、中國(guó)環(huán)科院等院校開展了利用光合細(xì)菌處理各種工業(yè)廢水的研究。九十年代起美國(guó)California University、法國(guó)St Martin d’Hères大學(xué)、日本NRIAIST、我國(guó)清華大學(xué)、同濟(jì)大學(xué)、浙江大學(xué)、中國(guó)科學(xué)院及河南農(nóng)業(yè)大學(xué)等開始利用光合細(xì)菌處理污水的同時(shí)產(chǎn)氫，以實(shí)現(xiàn)資源化。之后，陸續(xù)有利用光合細(xì)菌處理大豆加工廢水、味精廢水、養(yǎng)殖廢水、生活污水、蜜糖廢水、酒糟廢水、豬糞廢水焦化廢水、明膠廢水、含油廢水、印染廢水等的研究出現(xiàn)。
光合細(xì)菌具有水體自凈的作用，在飼料餌料、高級(jí)菌肥、水體凈化、天然色素等方面均有應(yīng)用，已經(jīng)是市場(chǎng)上常見的成熟產(chǎn)品。
研究成果
1.多種高濃度無(wú)毒無(wú)害廢水有效處理
研究表明，利用光合細(xì)菌在多種高濃度無(wú)毒無(wú)害廢水進(jìn)行培養(yǎng)，均得到了非常好的效果，如大豆廢水、白酒廢水、檸檬酸廢水、味精廢水等。其中有一些廢水直接處理效果不佳，但加入小分子進(jìn)行優(yōu)化和改進(jìn)后，均得到了良好的結(jié)果，如淀粉廢水、制糖廢水、乳制品廢水等。
2、菌體資源收獲
研究做了一系列的優(yōu)化方法，包括低強(qiáng)度超聲波刺激、加改進(jìn)用微量元素等，目前成果表明，污水培養(yǎng)收獲的光合細(xì)菌濃度已經(jīng)高于純培養(yǎng)基收獲的細(xì)菌濃度。
此外，光合細(xì)菌中主要成分為蛋白質(zhì)，一般可以達(dá)到50-60%的蛋白質(zhì)含量，研究課題組在一個(gè)經(jīng)過篩選出來(lái)的菌群進(jìn)行優(yōu)化培養(yǎng)后，目前可以達(dá)到80-90%的蛋白質(zhì)含量，這也為菌體的應(yīng)用開辟了一條新的路徑。
3、光合細(xì)菌新工藝
(1)組裝了PSB-MBR反應(yīng)器，出水達(dá)標(biāo)，光合細(xì)菌回收率99%。
(2)組裝了PSB-EDI反應(yīng)器，利用光合細(xì)菌+EDI處理并資源化回收高有機(jī)物高氨氮廢水。達(dá)到光合細(xì)菌去除廢水中有機(jī)物(95%)回收菌體資源，EDI回收水中的氨氮(90%)的作用。
(3)對(duì)高濃度有機(jī)廢水光合細(xì)菌轉(zhuǎn)化菌體價(jià)值研究發(fā)現(xiàn)，高濃度營(yíng)養(yǎng)型廢水年排放COD總量約55.0萬(wàn)噸，假設(shè)其中10%由光合細(xì)菌進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化，高濃度有機(jī)廢水處理中光合細(xì)菌的產(chǎn)率0.5，將獲得約2.2萬(wàn)噸的光合細(xì)菌菌體(干重)，大規(guī)模售價(jià)為現(xiàn)在的10%，即可獲利40-50億元，減少剩余污泥產(chǎn)量11萬(wàn)噸。
(本文為《水工業(yè)市場(chǎng)》根據(jù)張光明在“2017(第12屆)水處理行業(yè)熱點(diǎn)技術(shù)論壇”講話整理。)