金藻和硅藻的藻體顏色呈黃色至金棕色，這是因?yàn)樗鼈冚d色體內(nèi)雖然含有葉綠素a，但是更含有β-胡蘿卜素和類似于葉黃素的藻黃素，而且后2種色素的含量較大，因此使藻體顏色偏黃。

　　金藻包括的種類也相當(dāng)多，有的是單細(xì)胞，有的是分化不深的細(xì)胞群體。有些種類有鞭毛，有些則沒有。

　　硅藻的細(xì)胞壁含有硅質(zhì)，整個(gè)細(xì)胞形狀像小盒子一樣，通常由2片蓋在一起的殼片組成。殼片上有硅質(zhì)沉積，并且形成各種花紋。硅藻種類繁多，但都是單細(xì)胞的浮游植物或底棲植物。硅藻的繁殖率很高，光合作用能力也很強(qiáng)，因此它們是水域尤其是海洋中的重要生產(chǎn)者。海洋硅藻的繁殖有明顯的季節(jié)性差異。此外，由于硅藻殼含有大量不能溶解或不能被取食者消化的硅酸鈣、二氧化硅等硅質(zhì)物，它們死亡后遺留在海底的藻殼大量堆積后就能夠構(gòu)成硅藻土。

　　紅藻的藻體有的是絲狀，有的是片狀，有的是樹枝狀。它們絕大多數(shù)都生活在海里，細(xì)胞有較為堅(jiān)固的細(xì)胞壁，其中纖維素成分較多，細(xì)胞群體有膠質(zhì)包裹。紅藻的細(xì)胞內(nèi)有載色體，其中含有葉綠素a和b，還有α-胡蘿卜素、葉黃素以及大量的藻紅素。這些色素在不同紅藻中的不同含量組合使得藻體呈現(xiàn)紫色、紫紅色或紅色。其中，藻紅素是紅藻所特有的。我們經(jīng)常食用的紫菜以及制造瓊脂所需要的石花菜都屬于紅藻類。

　　褐藻都是海生藻類，有1500多種，它們的個(gè)體都是大型的或較大型的，例如人類經(jīng)常食用的海帶長度一般可長到2～4米，巨藻群則被形象地稱為“海中森林”，而馬尾藻聚生的海區(qū)構(gòu)成馬尾藻海，船只航行都不得不避開它。

　　褐藻體內(nèi)含有較多的葉黃素，使得藻體呈棕黃色，因此褐藻又稱為棕藻。

金藻用途：

　　1分布特點(diǎn)金藻多分布淡水水體，生活于透明度較大，溫度較低，有機(jī)質(zhì)含量低的水體。對溫度變化靈敏，多在寒冷季節(jié)，如早春和晚秋生長旺盛。在水體中多分布于中、下層。

　　2餌料價(jià)值浮游金藻沒有細(xì)胞壁，個(gè)體微小，營養(yǎng)豐富，是水生動(dòng)物很好的天然餌料，有的海產(chǎn)種類已人工培養(yǎng)，是水產(chǎn)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物人工育苗期間的重要餌料。

　　3顆石蟲軟泥和化石鈣板金藻、硅鞭金藻死亡后，遺骸沉于海底，可形成顆石蟲軟泥，有的形成化石，可為地質(zhì)年代的鑒別提供重要依據(jù)。

　　4三毛金藻的危害及防治小三毛金藻為一種害藻，能產(chǎn)生魚毒素，引起魚類大量死亡，在我國分布廣泛，大連、銀川、鳥梁素海、山西南部的咸水湖中，天津的塘沽及陜西皆有報(bào)道。此外，在海洋中也可形成赤潮，給漁業(yè)造成危害。

根據(jù)中華人民共和國衛(wèi)生部 (2010 年第 3 號(hào)) 關(guān)于批準(zhǔn) DHA 藻油、棉籽低聚糖等 7 種物品為新資源食品及其他相關(guān)規(guī)定的公告，“裂殖壺菌”為海洋微藻，即“裂壺藻”。其分類地位應(yīng)按照真核生物六界分類法，即真核生物域，囊泡藻界Chromalveolata，異鞭藻類(Heterokontophyta或Stramenopiles)，雙環(huán)門(Bigyra)，Labyrinthulomycetes目，Thraustochytriaceae科，Schizochytrium屬。

作者：郭致廷 / 編輯：歐陽孚、楊卓儒

這次我們要來介紹幾種常用來生產(chǎn)生物質(zhì)燃油的藻種。以供應(yīng)生物質(zhì)燃油原料為目標(biāo)的養(yǎng)殖場在選擇藻種時(shí)通常會(huì)有幾個(gè)考量。第一個(gè)考量為生長速度，生長速度會(huì)直接影響到生物質(zhì)產(chǎn)量，一般而言，藻類大約每6至72小時(shí)生物質(zhì)會(huì)增加一倍，生長速度越快則能采收的頻率越高。第二個(gè)考量為藻體含油量，目前藻類生物質(zhì)燃油仍以生物質(zhì)柴油為主，藻體含油量高就表示會(huì)有較多藻油能被轉(zhuǎn)換為生物質(zhì)柴油。然而藻體含油量高的藻種通常生長速度會(huì)比藻體含油量低的藻種慢，因此生長速度與含油量之間的取舍需考慮到最終燃油產(chǎn)物為何，以選擇較適當(dāng)?shù)脑宸N。第三個(gè)考量為藻類生長環(huán)境，依照預(yù)想的培養(yǎng)環(huán)境選擇藻種。例如在陸地上的養(yǎng)殖場便不適合培養(yǎng)海水藻，因?yàn)榇伺e必須承擔(dān)配制人工海水的額外費(fèi)用。其他還有一些諸如藻體形狀、生活形態(tài)、自養(yǎng)異養(yǎng)（注一）等特性在篩選藻種時(shí)也應(yīng)一并考慮。

螺旋藻 (Spirulina)

螺旋藻就跟它的名字一樣，單一個(gè)體就是螺旋狀長條，大小約為 0.5 毫米(mm)?？稍诘跋趟猩L，可進(jìn)行自營及異營作用。螺旋藻是非常常見的培養(yǎng)藻種，因?yàn)樗纳L速度快，大小相對於其他微藻大得多因此容易收集，適應(yīng)環(huán)境能力強(qiáng)，夏威夷、中國大陸南部、美國加州等熱帶地區(qū)皆有養(yǎng)殖廠 。螺旋藻大部份成份為蛋白質(zhì)，僅有約10-20%成份為油脂，因此不適合作為生物質(zhì)柴油原料藻種。然而也因?yàn)楦叩鞍踪|(zhì)含量而適合作為營養(yǎng)品或是動(dòng)物飼料。若讀者平時(shí)有留心注意的話，在一般藥局常?？梢姷穆菪邋V，即是由這些螺旋藻制成。

小球藻 (Chlorella)

小球藻的大小約在3-10微米(μm)之間，可以在淡咸水甚至土壤中發(fā)現(xiàn)他們的蹤跡。 它與螺旋藻一樣， 可依照環(huán)境進(jìn)行自營或異營作用。適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)環(huán)境為25~35℃的熱帶地區(qū)。小球藻依生長階段不同，油脂含量變化大。在初期快速生長時(shí)，僅有約20％的成份為藻油，然而當(dāng)受到環(huán)境壓迫的情況下（例如缺乏營養(yǎng)），油脂成份便開始提高，最高可達(dá)約50%藻體成份為油脂。因此小球藻是目前最廣為應(yīng)用於生物質(zhì)柴油的藻種。但是小球藻體型微小，收集難度較高，因此成本也比培養(yǎng)螺旋藻高。除此之外，常聽到的健康食品綠藻片，通常就是以小球藻制成。

柵藻 (Scenedesmus)

柵藻的名字是來自於它們時(shí)常并排出現(xiàn)的特性，長條形的柵藻會(huì)以偶數(shù)個(gè)體并排，看起來就像柵欄一樣，因此叫柵藻。體型比小球藻大，約10-25微米(μm)。柵藻僅能生活於淡水里，在陸上的湖泊、河流都可以發(fā)現(xiàn)它們的蹤跡。培養(yǎng)柵藻的適當(dāng)溫度比小球藻略低一些，20-30℃最為合適。它們的油脂含量在15-40%之間。因?yàn)槠溥m應(yīng)環(huán)境能力強(qiáng)、具備自營與異營的能力，越來越多人開始研究利用柵藻處理廢水來產(chǎn)生生物質(zhì)燃料的技術(shù)。

衣藻 (Chlamydomonas)

衣藻的特徵是具有兩條長長的鞭毛，是少數(shù)可在水中自由活動(dòng)的藻種。在細(xì)胞前端具有眼點(diǎn)(eye spot)，可以感應(yīng)光源位置而利用鞭毛移動(dòng)至光源充足的地方。大小約10-30 微米(μm)，屬於淡水藻。油脂含量大約是20%。部份種類可在低溫環(huán)境生長。衣藻是目前基因定序最完整的藻種，因此常見於基因改良工程。有許多研究改良吸收光源中心( Light Harvesting Complex)，增進(jìn)衣藻的光合作用效率。

葡萄球藻 (Botryococcus)

葡萄球藻是淡水藻，因其形狀以及傾向聚集在一起的特性而得名。大小約為8-15 微米(μm)。葡萄球藻是目前油脂含量最高的藻種，最高可達(dá)86%成份皆為油脂。然而葡萄球藻的數(shù)量大約每72小時(shí)才能成長一倍。相較於小球藻約8小時(shí)成長一倍的速度，葡萄球藻的生長速度可說是非常緩慢。并且經(jīng)過進(jìn)一步研究指出，葡萄球藻的油脂并不適於轉(zhuǎn)脂化制成生物質(zhì)柴油。因此目前越來越少人使用葡萄球藻作為生物質(zhì)燃油之用。

(注一)自養(yǎng)、異養(yǎng)：

透過吸收陽光與二氧化碳來產(chǎn)生能量的過程稱為光合作用，而依靠光合作用生長的生物稱為自營（自養(yǎng)）生物。相對於自營生物，需要由外界攝取有機(jī)物以維持生命的生物稱為異營（養(yǎng)）生物。所有藻類都具備自營的能力，而部份藻種則同時(shí)具備自營和異營的能力，這種藻類我們稱為混營藻。

海水受到污染，得到大量有機(jī)物，營養(yǎng)鹽過剩，溫度、陽光適宜等，某些藻類會(huì)突然大量繁殖，使海水變色，發(fā)生赤潮。能引發(fā)赤潮的藻類稱為“赤潮藻”。這些藻類分別隸屬于藍(lán)藻門、綠藻門、裸藻門、金藻門、黃藻門、硅藻門、甲藻門、隱藻門等8個(gè)門類。

有害赤潮（Harmful Algal Blooms, HAB）藻毒素是由海洋微藻產(chǎn)生的一類特殊生物活性物質(zhì)的總稱。在大約5000多種海洋微藻中，能夠形成赤潮的微藻大約有300種左右，而其中30-40種被證實(shí)含有毒素。赤潮藻類毒素在結(jié)構(gòu)上差別很大。既有簡單的氨基酸類物質(zhì)，也有復(fù)雜的多醚類化合物。由于大部分毒素最早是從攝食有毒微藻的貝類和魚類體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的，因此這些毒素往往被稱作貝毒或魚毒。根據(jù)致人中毒的癥狀可以將赤潮藻毒素分為五大類：麻痹性貝毒(Paralytic Shellfish Poisoning, PSP), 腹瀉性貝毒(Diarrhetic Shellfish Poisoning, DSP), 記憶缺失性貝毒(Amnesic Shellfish Poisoning, ASP), 神經(jīng)性貝毒(Neurotoxic Shellfish Poisoning, NSP)和西加魚毒（Ciguatera Fish Poisoning, CFP）等。此外還有一類微藻產(chǎn)生的活性物質(zhì)，如各種高不飽和脂肪酸、糖酯等，由于它們主要造成養(yǎng)殖魚類死亡，通常被統(tǒng)稱為魚毒類毒素（Ichthyotoxins）。

上海光語生物科技有限公司提供赤潮藻藻種如下：

如有更新請?jiān)L問藻種庫開發(fā)清單

微藻營養(yǎng)豐富，是魚、蝦、貝等經(jīng)濟(jì)動(dòng)物人工育苗的基礎(chǔ)。特別是海洋微藻，由于富含EPA和DHA，在許多方面受到人們的青睞。在微藻的培養(yǎng)和應(yīng)用中，保種技術(shù)十分重要，它是微藻培養(yǎng)和進(jìn)一步應(yīng)用的基礎(chǔ)和關(guān)鍵環(huán)節(jié)。由于藻種極易受污染，分離培養(yǎng)方法比較復(fù)雜而且耗時(shí)較長，因此，在微藻保種工作中要盡量減少接種次數(shù)，避免藻種被雜藻、細(xì)菌或原生動(dòng)物污染，既能達(dá)到長期貯藏種質(zhì)的目的，又能維持藻種的活性，是微藻科研工作者努力的方向之一。本文就微藻保存的幾種常用方法介紹如下。

一、繼代法保存

繼代保存法是目前普遍采用的方法，使用于一切藻種的保存。通常在常溫或常低溫進(jìn)行。常溫一般指15℃～25℃，常低溫一般指0℃～15℃，藻種可接種在固體、液體或雙相培養(yǎng)基中。接種后應(yīng)首先放在適宜的光照條件下培養(yǎng)，待藻細(xì)胞生長繁殖達(dá)到較高密度，可見明顯的條狀或塊狀的藻細(xì)胞群時(shí)，再移置低溫、弱光的條件下保藏。保藏半年到1年后必須進(jìn)行轉(zhuǎn)接。此方法簡單易行，但是保存時(shí)間短，而且繼代頻繁，容易發(fā)生污染和變異。

二、固定化保存法

固定化細(xì)胞（1mmobilized cells）是指將游離細(xì)胞包埋在多糖或多聚化合物制成的網(wǎng)狀支持物中，固定載體束縛藻種，影響其代謝過程，從而抑制細(xì)胞的生長和分裂。固定化微生物技術(shù)是在20世紀(jì)60年代固定化酶技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的，1978年以來，固定化技術(shù)就被用來作為延長光合細(xì)胞壽命的一種重要手段。但微藻存活時(shí)間從1個(gè)月到幾年不等。張繼紅將三角褐脂藻固定在褐藻酸鈣凝膠中，可保存3～5年；Tamponnet等報(bào)道了固定化纖細(xì)裸藻存活2年；矮小海鏈藻（Thalassiosira pseudonana）和賀氏鈣板金藻 （Emiliana hux liyi）僅能保存3個(gè)月。近來孟妍等人采用褐藻膠包埋技術(shù)與干燥脫水技術(shù)相結(jié)合將綠色巴夫藻常溫保存，保存時(shí)間可達(dá)6個(gè)月存活率高達(dá)77.6%。

固定化保種技術(shù)對多數(shù)微藻是適用的，該法可以在常低溫下實(shí)現(xiàn)對藻類的中期保存，培養(yǎng)保存時(shí)間較長，活化復(fù)蘇快，技術(shù)設(shè)備簡單，細(xì)胞外滲少，而且可用于次生代謝物質(zhì)的生產(chǎn)。在一般的微藻實(shí)驗(yàn)室內(nèi)都能進(jìn)行。但固定化程序較復(fù)雜，大多數(shù)微藻在培養(yǎng)后期常會(huì)從膠珠中溢出。而且，現(xiàn)有的資料表明，某種固定化方法只適用一定種類的微藻，對于其他種類的微藻會(huì)有不同的反應(yīng)，原因復(fù)雜，還需要做更深入、廣泛的研究。這就給固定化保種技術(shù)的推廣帶來了一定的困難。

三、超低溫保種技術(shù)

所謂超低溫保存區(qū)別于其他低溫概念的冰箱溫度（4℃～～40℃）和干冰溫度（～79℃），是指在液氮低溫（～196℃）下保存。此時(shí)生物體的物質(zhì)代謝和生長活動(dòng)幾乎完全停止。可是它們?nèi)蕴幱诳赡娴某苫顮顟B(tài)。早在20世紀(jì)70年代，英國的Morris等就對海產(chǎn)單胞藻進(jìn)行了超低溫保存研究，取得了在～196℃下保存1年，存活率100%的結(jié)果。目前普遍采用兩步冷凍法，即慢速降溫進(jìn)行冷適應(yīng)，然后投入液氮中保存。王起華等用兩步冷凍法研究了3種餌料金藻，其存活率均在30%左右。

超低溫保存法具有保持種質(zhì)遺傳穩(wěn)定性、對藻種進(jìn)行優(yōu)勝劣汰、便于長期保存、能最大限度地減少污染等方面的優(yōu)點(diǎn)，還能省去藻種的活力監(jiān)測和繁殖更新。但微藻的種類很多，生理狀態(tài)各異，適宜的保存條件各不相同，找出不同微藻的超低溫保種方法困難，而且不同的細(xì)胞要求不同類型、不同濃度的抗凍劑， 至今還沒有找出1種對所有種類都適用的保護(hù)劑。但隨著研究的深入，在探明生物細(xì)胞凍害和抗凍機(jī)理的基礎(chǔ)上，超低溫保存微藻藻種的應(yīng)用前景將會(huì)是十分光明的。

四、濃縮低溫保存技術(shù)

濃縮低溫保存法是將藻液高密度培養(yǎng)后，采用物理、化學(xué)的方法濃縮1000倍左右，再低溫保存。國外自80年代末開始就有對海洋經(jīng)濟(jì)微藻的濃縮方法和低溫保存方法進(jìn)行研究，取得了不少的研究成果，其中美國、英國和日本已有相應(yīng)的產(chǎn)品（微藻濃縮細(xì)胞或稱“藻膏”）問世。蔣霞敏等將小球藻和球等鞭金藻301（1sochrysis galbana Park）濃縮后，在5℃～7℃的冰箱中保存1～3個(gè)月后恢復(fù)生長獲得好于常溫的效果。孫建華、王如才（1993）對小新月菱形藻（Nitzschia closterium）、球等鞭金藻的濃縮和保存方法進(jìn)行了研究，濃縮藻液在1℃～4℃的低溫下加保護(hù)劑SAMs保存3個(gè)月，復(fù)蘇后效果良好。
濃縮低溫保存多用于海洋微藻。微藻濃縮液的生產(chǎn)，可以使海洋微藻的生產(chǎn)與使用保留一定的時(shí)間差。但相對保存時(shí)間較短，海洋微藻的抗逆原理還有待作更多的研究和探討。

五、冷凍真空干燥保存法

冷凍真空干燥保存法是在極低溫度下（～70℃左右）快速冷凍，然后在極低溫度下真空干燥，使藻種的新陳代謝活動(dòng)處于高度靜止?fàn)顟B(tài)。19世紀(jì)末Fkral與Mudd創(chuàng)立的冷凍真空干燥法是迄今公認(rèn)最佳的藻種保存法，嚴(yán)珍等選擇脫脂牛奶作為保護(hù)劑，將藻液放入安瓿管中，冷凍、干燥并抽真空，火焰熔封。在低溫避光處保存，預(yù)計(jì)最大保存年限為18年。冷凍干燥保存法優(yōu)點(diǎn)是微藻復(fù)蘇效果好，保藏期內(nèi)可避免其他雜菌污染，便于攜帶運(yùn)輸，易實(shí)現(xiàn)商品化生產(chǎn)；其缺點(diǎn)是操作繁瑣、對設(shè)備要求高等；應(yīng)用前景十分光明。

六、低溫甘油生理鹽水法

低溫甘油生理鹽水法是對甘油原液保存法的改進(jìn)。加入生理鹽水適當(dāng)降低了甘油的高滲作用，更有利于藻種的保存。在藻液中人一定的甘油作保護(hù)劑，同時(shí)加入一定的生理鹽水，混勻后直接放置在～20℃±0.5℃冰箱放置保存。保存時(shí)間長，一般3年左右。
綜上所述，單細(xì)胞藻類的保種技術(shù)尚沒有發(fā)展成為一項(xiàng)成熟穩(wěn)定的技術(shù)，許多問題還有待于我們?nèi)ヌ剿鳎_展微藻保種方面的研究工作，不但會(huì)填補(bǔ)微藻保種理論研究上的空白，還會(huì)在生產(chǎn)實(shí)踐中發(fā)揮應(yīng)有的作用。

為了課題研究，有的時(shí)候我們需要從國外藻種庫購買一些藻種。境外購藻通常有兩種方式，一種是通過熟人回國的時(shí)候帶回來；另一種就是網(wǎng)購。通常情況下，網(wǎng)購是最常用，最有效的。鑒于我自己有2次網(wǎng)購的經(jīng)歷，現(xiàn)在我把我的經(jīng)驗(yàn)分享給大家，希望能為大家提供一些參考，如果有不妥的地方還請大家批評指正，同時(shí)也希望大家能夠把自己的經(jīng)驗(yàn)分享出來，幫助更多的人。

1.?捷克藻種庫CCALA

捷克藻種庫,全稱為Culture?Collection?of?Autotrophic?Organisms（CCALA），是捷克科學(xué)院植物研究所下屬的一個(gè)機(jī)構(gòu)，官方網(wǎng)址為：http://ccala.butbn.cas.cz/index.php。藻種價(jià)格上相對比較便宜一點(diǎn)，如果用于科學(xué)研究會(huì)打半折（注意，捷克是用歐元進(jìn)行結(jié)算的）。下面我以購買卵囊藻（Oocystis）為例，介紹一下主要的購買流程：

首先，進(jìn)入官方首頁，點(diǎn)擊Search，如圖：

進(jìn)入搜索頁面，輸入并搜索你要的藻種，如圖

點(diǎn)擊Search，進(jìn)入搜索結(jié)果界面，這時(shí)你可以看見藻種編號(hào)及藻種，在藻種圖片的上訪有一個(gè)購物車（紅色框）的圖標(biāo)，點(diǎn)擊它購買藻種，如圖：

這時(shí)，購物車由原來的綠色變成了橙色，同時(shí)左邊的目錄欄出現(xiàn)了橙色的購物車標(biāo)志。如圖：

點(diǎn)擊目錄欄的Order，查看你的購物車，顯示你要購買的藻種的一些信息，如圖：

根據(jù)需要選擇，我個(gè)人建議選擇固體和液體各1個(gè)，填寫完成后，點(diǎn)擊下方的Write?Order進(jìn)入購買人信息填寫頁面，如圖

地址填寫應(yīng)該很簡單（粉紅色的必填），主要注意下面的選項(xiàng)，在Need?the?pro-forma?invoice?選項(xiàng)中選擇YES，形式發(fā)票還是需要的，這樣方便你匯款轉(zhuǎn)賬，對于Payment?preference選項(xiàng)，根據(jù)你個(gè)人需要選擇，我選擇的是bank?transfer。重要的一個(gè)選項(xiàng)，Use?of?strains，建議選擇academic/research，因?yàn)榭梢源虬胝踍_^…，最后一個(gè)選項(xiàng)?Addition?notes/Special?requirements你可以填寫你希望收貨的日期、快遞公司及開具證明等信息，也可以什么都不寫。填寫完成后，點(diǎn)擊下面的Send?Order，訂單就會(huì)發(fā)給他們了，這時(shí)系統(tǒng)會(huì)自動(dòng)生成一個(gè)word文檔如圖：

過一段時(shí)間，藻種庫就會(huì)把電子檔的發(fā)票發(fā)到你的E-mail信箱，如圖：

并附上一段話，就是讓你付款的。如圖：

付款后，你就等著收貨吧！快的話半個(gè)月左右就會(huì)收到！

注意，如果你沒有特別要求，捷克藻種庫會(huì)用中國郵政。你可以在他們發(fā)貨后，向他們索取快遞號(hào)，方便自己再網(wǎng)上查詢到藻種運(yùn)輸情況。

2.?英國藻種庫CCAP

CCAP官方網(wǎng)址：http://www.ccap.ac.uk/，下面同樣以卵囊藻（Oocystis）為例，簡單介紹一下購買流程：

首先，進(jìn)入主頁，在主頁中間部分點(diǎn)擊Order?Cultures>go，進(jìn)入購買界面，如圖：

在購買界面，懸著Search?the?strain?data進(jìn)入搜索藻種界面，如圖：

輸入藻種名稱，并點(diǎn)擊Search，彈出結(jié)果，如圖：

點(diǎn)擊購物車標(biāo)志（紅色框），將藻種加入購物車，如圖：

然后再該頁的上面，點(diǎn)擊購物車標(biāo)志（紅色框），如圖：

進(jìn)入order?form界面，填寫客戶信息，如圖：

與捷克藻種庫要求差不多，這里就不贅述了，填寫完成后點(diǎn)擊頁面下方的Send，將訂購信息發(fā)給CCAP，注意CCAP是用英鎊結(jié)算的。

這里面注意，CCAP會(huì)要求你給他幾周時(shí)間，如圖：

是因?yàn)椋麄冃枰獣r(shí)間進(jìn)行接藻。所以你大約會(huì)1個(gè)月后收到藻種。

Send一段時(shí)間以后，CCAP就會(huì)給你發(fā)過來一封E-mail，主要內(nèi)容是訂單的信息同時(shí)希望你盡快匯款，如圖：

匯款方式，前面已經(jīng)介紹過了，這里提一下與捷克藻種庫不同的是，CCAP發(fā)的是聯(lián)邦快遞，聯(lián)邦快遞比較貴，同時(shí)需要注意的是關(guān)稅問題，關(guān)稅如何收取的，超過多少錢收關(guān)稅，這個(gè)我沒有去找資料，我的個(gè)人經(jīng)歷是，從捷克藻種庫購買的藻種沒有交付關(guān)稅，而從CCAP購買的藻種除了付了購藻的錢，我拿到貨物之后又付了300多人民幣的關(guān)稅，原因很可能是我在CCAP購買的藻種較多，價(jià)錢超過了一定額度，但是我沒有去考證。。

以上就是一些經(jīng)驗(yàn)和主要的購買流程，應(yīng)該比較詳細(xì)了（可能也有點(diǎn)啰嗦^_^..），因?yàn)橐呀?jīng)過去幾個(gè)月的時(shí)間了，可能有些細(xì)節(jié)還是沒能說明白，希望大家諒解。

用 Sequin 向 NCBI 提交序列 。

Sequin下載

（下載頁面：http://www.ncbi.nlm.nih.gov/Sequin/index.html）

Sequin介紹

1. 提交的是批量而且比較復(fù)雜的序列
2. you are submitting mutation, phylogenetic, population, environmental, or segmented sets
3. 喜歡圖形的界面，有更的選項(xiàng)和功能，可以批量修改
4. 獲得相關(guān)的分析工具
5. 隨時(shí)可以保存

Sequin提交序列圖解教程

1，Sequin開始界面

開始一個(gè)新的提交或是選擇編輯已有保存的文件（Read Existing Record），用Sequin的好處就是你可以保存下來，可以隨時(shí)修改。直到滿意后再向NCBI提交。

2，輸入Title，作者，聯(lián)系方式等

Title是必須的。自行添寫一個(gè)。然后點(diǎn)Next Page到Contact菜單，添加聯(lián)系方式。再Next Page，填寫作者等。能填寫的就填上，越詳細(xì)當(dāng)然是越好的。不知道的話可以跳過，因?yàn)楹竺嬉彩强梢灾匦滦薷牡摹?/p>

3，添加序列

準(zhǔn)備一個(gè)Fasta格式的序列。保存在一個(gè)文件?？梢赃x擇單個(gè)序列或是批量序列。其它的Type都是比較特殊，不常見。

4，添加序列的注釋信息

上傳了序列之后，點(diǎn)擊Next Page繼續(xù)添加序列的信息，如屬于哪個(gè)物種的，序列注釋。有沒有蛋白序列等。這里也是一樣，能填的就填上，不懂就Next。后面也是可以修改的。

5，GenBank格式的界面，最后修改

Edit菜單

上面的步驟都完了之后。出現(xiàn)一個(gè)GenBank格式的界面，如下圖。在這里，一切信息就一目了然。那里不對，需要修改的。雙擊就行了。另外，在Edit菜單比較修改作者、聯(lián)系方式等資料。

Annotate菜單

在Annotate菜單可以添加序列的注釋，也可以批量添加。如加CDS區(qū)，exon區(qū)等等。其格式可以參照其它序列的GenBank格式。

6，保存序列

如果在中途要臨時(shí)保存，在File菜單的Save，保存后的文件是.sqn。全部修改完畢后，選擇File/Submission。就會(huì)有一個(gè)提示框，提示把保存后的發(fā)送一封郵件到NCBI。

7，發(fā)送郵件提交序列

把保存后的.sqn文件發(fā)到[email protected]。等待幾天，NCBI就會(huì)有回音的啦。