藻，這一神奇而多樣的生物群體，遠(yuǎn)非如此簡(jiǎn)單地被溫度所定義。誠(chéng)然，20-30 度可能是不少常見(jiàn)藻種較為理想的生長(zhǎng)區(qū)間，在這個(gè)溫度范圍內(nèi)，它們能展現(xiàn)出良好的活力與生機(jī)，進(jìn)行著光合作用，為生態(tài)系統(tǒng)貢獻(xiàn)著自己的力量。
但我們不能忽視的是，大自然的奇妙之處就在于其無(wú)盡的多樣性。在廣闊的天地間，存在著各種特殊環(huán)境下的藻。有些藻能夠在溫度遠(yuǎn)超 30 度的炎熱水域中倔強(qiáng)生長(zhǎng)，它們以頑強(qiáng)的生命力對(duì)抗著高溫的挑戰(zhàn)，發(fā)展出獨(dú)特的生存策略；而在寒冷的極地或者高海拔地區(qū)，也有藻的身影，它們適應(yīng)著接近甚至低于 0 度的低溫，在冰天雪地中悄然綻放生命的色彩。
我們應(yīng)該以更開(kāi)放的視角和更深入的探索去認(rèn)識(shí)藻。不要被固有觀(guān)念所束縛，要知道每一種藻都有著自己獨(dú)特的溫度適應(yīng)區(qū)間，都在各自的環(huán)境中演繹著屬于它們的精彩故事。
我們對(duì)藻的理解不應(yīng)局限于那看似約定俗成的 20-30 度，而應(yīng)去探尋它們?cè)诟鞣N極端溫度下的秘密與奇跡。只有這樣，我們才能真正領(lǐng)略到藻世界的廣袤與神奇，才能更加全面地認(rèn)識(shí)和珍惜這些大自然賦予我們的奇妙生物。讓我們打破思維的藩籬，去重新審視那被我們誤解的藻與溫度的關(guān)系吧。
如果您想了解更多的藻知識(shí)，請(qǐng)聯(lián)系我們。我們是一家做藻及光反應(yīng)器的公司。做藻，我們是認(rèn)真的！
The post 別再誤解“藻”！藻之溫度豈是20-30所能框定？ first appeared on 上海光語(yǔ)生物科技有限公司.]]>The medium given below can be made with either artificial seawater or natural seawater.
Artificial Seawater
Make two separate solutions: Solution I and Solution II. Add salts in order to distilled
deionized water (DDW). When the salts in each are completely dissolved mix
solutions together. Dilute to total volume with DDW.
| Solution I: Anhydrous salts |
Molecular Weight (g/mol) |
Amount to weigh: (g/l solution) |
Concentration (mM) |
| NaCl | 58.44 | 20.756 | 362.7 |
| Na2SO4 | 142.04 | 3.477 | 25.0 |
| KCl | 74.56 | 0.587 | 8.03 |
| NaHCO3 | 84 | 0.17 | 2.067 |
| KBr | 119.01 | 0.0845 | 0.725 |
| H3BO3 | 61.83 | 0.022 | 0.372 |
| NaF | 41.99 | 0.0027 | 0.0657 |
| Solution II – Hydrated salts | |||
| MgCl2?.?6H2O | 203.33 | 9.395 | 47.18 |
| CaCl2?.?2H2O | 147.03 | 1.316 | 9.134 |
| SrCl2?.?6H2O | 266.64 | 0.0214 | 0.082 |
| Enrichment Stocks | Stock Conc.(g/L) | Final Conc.(μM) | |
| 1 | NaNO3 | 46.67 | 549.1 |
| 2?* | Na2glycerophosphate | 6.67 | 21.8 |
| 3 | Na2SiO3?.?9H2O | 15.00 | 105.6 |
| 4?** | Na2EDTA?.?2H2O | 3.64 | 9.81 |
| *** | Fe(NH4)2(SO4)2?.?6H2O | 2.34 | 5.97 |
| FeCl3?.?6H2O | 0.16 | 0.592 | |
| 5 | MnSO4?.?4H2O | 0.54 | 2.42 |
| ZnSO4?.?7H2O | 0.073 | 0.254 | |
| CoSO4?.?7H2O | 0.016 | 0.0569 | |
| Na2MoO4?.?2H4O | 0.126 | 0.520 | |
| **?Na2EDTA?.?2H2O | 1.89 | 5.05 | |
| 6 | H3BO3 | 3.80 | 61.46 |
| 7 | Na2SeO3 | 0.00173 | 0.001 |
Enrichment stocks can be refrigerated. Adjust Solution #5 to pH 6 using solid NaCO3?(about 2 g). Solution # 4 can be heated to dissolve the iron.
Notes:
*?Can be replaced with an equimolar stock of Na2HPO4
**?Add before the trace metals.
***?Can be replaced with an equimolar stock of FeCl3
| Vitamin Stock | Stock Conc.(g/L) | Final Conc.(mM) |
| Thiamine | 0.1 | 2.97 x 10-1 |
| Vitamin B12 | 0.002 | 1.47 x 10-3 |
| Biotin | 0.001 | 4.09 x 10-3 |
Vitamin stocks should be stored frozen.
TO MAKE 1 LITRE OF HESNW
1) Filter natural seawater through 0.45 μm membrane filter with a glass fiber prefilter.
2) Use a flask that has been acid-washed in 10% HCl and rinsed in distilled water before first use.
3) Pour 1 L filtered seawater or artificial seawater into flask. Add the following while mixing with a stir-bar:
a) 6 ml Combined Stock (Enrichment stocks #1,2,4-7)
(OR 1 ml of each individual stock solution)
b) 2 ml Silica Stock (Enrichment stock #3)
c) 2 ml Vitamin Stock
4) To reduce precipitation during autoclaving add:
d) 1.44 ml of 1N HCl
e) 0.12 g Sodium bicarbonate
5) Autoclave 20 minutes for one litre, ~ 30 minutes for 2 litres. Autoclaving for longer periods will result in more precipitation. Flasks should not be filled up more than 2/3 of their capacity, to avoid boiling over during sterilization.
6) Let stand for 2 days to allow pH to equilibrate (should be ~ pH 8.2).
7) Filter aseptically through a glass fiber filter to remove precipitate. Some taxa appear to be sensitive to it (optional).
Reference
Harrison, P.J., R.E. Waters and F.J.R. Taylor. 1980. A broad spectrum artificial medium for coastal and open ocean phytoplankton. J. Phycol. 16:28-35.
The post ESAW培養(yǎng)液（ESAW/HESNW Culture Medium） first appeared on 上海光語(yǔ)生物科技有限公司.]]>
1．氮(N)??單胞藻培養(yǎng)液常用的氮源有硝酸鉀(KNO3)、硝酸鈉(NaNO3)、尿素(NH2CONH2)、硝酸銨(NH4NO3)、硝酸鈣[Ca(NO)3)2]、氯化銨(NH4C1)、硫酸銨[(NH4)2SO4]、發(fā)酵人尿……等。其中以硝酸鈉和硝酸鉀最常用。但不同的藻類(lèi)對(duì)硝酸態(tài)氮和銨態(tài)氮的吸收利用情況是不同的，必須根據(jù)不同的藻類(lèi)選擇合適的氮源。
2．磷(P)??單胞藻培養(yǎng)液常用的磷源有磷酸二氫鉀(KH2PO4)、磷酸二氫鈉、(NaH2PO4)、磷酸氫二鉀(K2HPO4)、磷酸氫二鈉(Na2HPO4)4種。海水單胞藻培養(yǎng)液應(yīng)用磷酸二氫鉀，如用磷酸氫二鉀所配培養(yǎng)液會(huì)產(chǎn)生大量沉淀。
3．鐵(Fe)??單胞藻培養(yǎng)液常用的鐵源有三氯化鐵(FeCl3)、硫酸鐵(FeSO4)、硫酸高鐵[Fe2(SO4)3]、氧化鐵(FeO)、檸檬酸鐵(FeC6H5O7)、檸檬酸鐵銨[Fe(NH4)3(C6H5O7)]等。其中最常用的是三氯化鐵和檸檬酸鐵。無(wú)機(jī)鐵在水中容易形成一種膠體復(fù)合物，無(wú)可逆反應(yīng)，不能為生物利用。鐵也容易產(chǎn)生沉淀。所以盡管鐵在數(shù)量上所需很少，但要滿(mǎn)足藻類(lèi)需要卻很困難。要保持溶液中可利用態(tài)鐵的數(shù)量，通常采用3種方法，這些方法都取得一定的成功，但都不夠十分完善。
由于無(wú)機(jī)鐵容易形成膠體復(fù)合物和沉淀，而有機(jī)鐵，如檸檬酸鐵、酒石酸鐵等則是可溶性的，易為藻類(lèi)細(xì)胞利用，在培養(yǎng)液配方中可使用有機(jī)態(tài)鐵代替無(wú)機(jī)態(tài)鐵。
因藻類(lèi)對(duì)鐵元素需要量不大，也有部分科學(xué)工作者，把鐵列為微量元素。
4．鉀(K)??單胞藻培養(yǎng)液中鉀的來(lái)源常用的有氯化鉀(KCl)、硝酸鉀(KNO3)、磷酸二氫鉀(KH2PO4)、磷酸氫二鉀(K2HPO4)等。一般培養(yǎng)液中由于氮、磷元素的加入，也附帶加入了鉀營(yíng)養(yǎng)元素。除此以外，可再加入氯化鉀。
5．鎂(Mg)??培養(yǎng)液中鎂的來(lái)源，常用的是硫酸鎂(MgSO4)和氯化鎂(MgCl2)兩種。可以單獨(dú)使用其中一種，也可兩種同時(shí)使用。鎂元素在天然海水中的含量很大(1?200mg/L以上)，一般是足夠的。
6．硫(S)??培養(yǎng)液中硫的來(lái)源一般是加入其他營(yíng)養(yǎng)元素的硫酸鹽類(lèi)(如硫酸銨、硫酸鎂、硫酸鐵、硫酸高鐵、硫酸錳、硫酸銅等)在獲得其他營(yíng)養(yǎng)元素的同時(shí)，也獲得了硫元素。
7．鈣(Ca)??培養(yǎng)液中鈣的來(lái)源，常加入氯化鈣(CaCl2)或硝酸鈣[Ca(N03)2]。
8．硅(Si)??在硅藻培養(yǎng)液中一般都加入硅元素，硅元素的來(lái)源，常用的是硅酸鈉(Na2SO3)和硅酸鉀(K2SiO3)。
微量元素的種類(lèi)很多，但單胞藻培養(yǎng)液配方中常用的約10余種?，F(xiàn)將其名稱(chēng)及一般使用的化合物列舉如下：
1．硼(B)??硼酸(H3BO3)，焦性硼酸鈉(Na2B4O7)。
2．錳(Mn)??硫酸錳(MnSO4)，氯化錳(MnCl2)。
3．鋅(Zn)??硫酸鋅(ZnSO4)，氯化鋅(ZnCl2)。
4．銅(Cu)??硫酸銅((ZuSO4)，氯化銅(CuCl2)。????
5．鉬(Mo)??鉬華(MoO3)，鉬酸銨[(NH4)2O.7MoO3]。
6．鈷(Co)氯化鉆(CoCl2)。??
7．鈦(Ti)??氯化鈦(TiCl2)。????????
8．鎢(W)??鎢酸鈉(Na2wO4)。
9．鉻(Cr)??硫酸鉻鉀[CrK(SO4)2]，鉻酸鉀(K2CrO4)。
10．鎳(Ni)??硫酸鎳(NiSO4)。
11．釩(V)??釩酸鈉(NaVO3)，釩酸銨(NH4VO3)。
12．鎘(CA)??氯化鎘(CdCl2)。
13．鍶(Sr)??硫酸鍶(SrSO4)。
這些微量元素可以分開(kāi)單項(xiàng)列于培養(yǎng)液配方中，也可以把微量元素集中配成微量元素溶液，然后按一定量加入培養(yǎng)液中。這些微量元素溶液有各種配方，一些常用配方將在第69～70頁(yè)介紹。
藻類(lèi)對(duì)微量元素的需要量和中毒量(致毒量)的差距一般很狹小，略微超過(guò)需要量即會(huì)引起中毒。微量元素也容易形成膠體復(fù)合物和發(fā)生沉淀，使藻類(lèi)細(xì)胞不能利用。由于以上兩種原因，致使在培養(yǎng)液中保持適量的微量元素是很困難的。絡(luò)合劑的應(yīng)用是解決以上困難的辦法之一。
良好的田園土壤抽出液一般含有藻類(lèi)生長(zhǎng)繁殖所需要的各種微量元素和溶解有機(jī)物質(zhì)，且具有類(lèi)似絡(luò)合劑的作用。所以在培養(yǎng)液中加入土壤抽出液是解決微量元素供應(yīng)的有效辦法。
藻類(lèi)除了必須吸收無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)之外，也吸收水中的溶解有機(jī)物質(zhì)，如維生素Bl、維生素B12、生物素……等，這些物質(zhì)對(duì)藻類(lèi)的生長(zhǎng)有輔助作用，稱(chēng)為輔助生長(zhǎng)有機(jī)物質(zhì)。
輔助生長(zhǎng)有機(jī)物質(zhì)能促進(jìn)藻類(lèi)細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖，還能增強(qiáng)藻類(lèi)細(xì)胞對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力，因此受到重視，加入培養(yǎng)液中的輔助生長(zhǎng)有機(jī)物質(zhì)種類(lèi)也愈來(lái)愈多。常用的有維生素B12、維生素B1(硫銨素)、維生素B2、維生素B6、維生素H、生物素、檸檬酸、乳精酸、煙酸，對(duì)氨安息香酸、葉酸、泛酸鈣、肌醇、腐肉堿、胸(腺)間氮苯、葡萄糖、肝抽出物、酵母抽出物、貝肉湯、魚(yú)粉、咸魚(yú)汁……等。
輔助生長(zhǎng)有機(jī)物質(zhì)可以分別加入培養(yǎng)液中，也可以把多種輔助生長(zhǎng)有機(jī)物質(zhì)配成混合液，稱(chēng)維生素溶液，在配制培養(yǎng)液時(shí)按一定比例加入。
土壤抽出液除含有無(wú)機(jī)微量元素外，還含有某些輔助生長(zhǎng)有機(jī)物質(zhì)。在培養(yǎng)液中加入土壤抽出液實(shí)際上加入了某些輔助生長(zhǎng)有機(jī)物質(zhì)。
土壤抽出液含有單細(xì)胞藻類(lèi)需要的微量元素和輔助生長(zhǎng)有機(jī)物質(zhì)，培養(yǎng)液中加入適量的土壤抽出液，一般能獲得良好效果。
土壤抽出液的制作雖然簡(jiǎn)單，但處理方法各有不同?，F(xiàn)將常用的方法介紹如下。
1．土壤抽出液I??取土壤1kg，加純水1?000ml，煮沸60min，在暗處放置2d，過(guò)濾，以濾液600ml加純水400ml使用。
2．土壤抽出液Ⅱ??取土壤1kg，加純水1?000ml，再加入氫氧化鈉2～3g，煮沸120min，冷卻后過(guò)濾，濾液直接使用。????
3．土壤抽出液Ⅲ??取土壤1kg，加自來(lái)水2?000ml，煮沸煎濃，把上部泥漿傾入燒杯中澄清，靜置一晝夜后，次日吸取上層清液，再煮沸煎濃。第3天再如法煎煮，最后傾入三角燒瓶中，加棉花塞，煎濃，直至得到l?000ml的深褐色的土壤抽出液。每次使用后，煮沸滅菌保存(朱樹(shù)屏，1964．)。????
4．土壤抽出液Ⅳ取田園土壤1kg，加水2?000ml，攪拌均勻，浸泡，用前吸取上清液，煮沸消毒后使用(黎尚豪等，1959)。
5．海泥(或土壤)抽出液V??取海灘上砂質(zhì)較少，有機(jī)質(zhì)較多而又不是過(guò)分淤黑的上層軟泥(或田園土壤)，清除其中的小樹(shù)枝和小石塊等雜物，以容量計(jì)算1份泥加2份水，充分?jǐn)嚢杈鶆?，靜置l～2min，待粗砂、小石下沉，把上層泥漿傾人鋁鍋中，棄去底部粗砂、小石等雜物，按每1?000ml泥漿加入NaOH?1g的量加入NaOH，煮沸20～30min，煮時(shí)需不斷攪拌。煮后靜置24h，吸取上清液使用。海泥抽出液吸出后，除當(dāng)天使用外，可以裝入大燒瓶中再經(jīng)煮沸1～2次(每天1次)，可作較長(zhǎng)時(shí)間的保存，使用時(shí)再經(jīng)煮沸。
不同地點(diǎn)取的土壤或海泥制成的土壤抽出液或海泥抽出液的營(yíng)養(yǎng)成分和數(shù)量是不相同的，這是由于不同地點(diǎn)的土壤或海泥所含物質(zhì)的成分和數(shù)量存在著差別的緣故。因此在取用土壤或海泥時(shí)，必須固定地方，不要經(jīng)常變換，對(duì)其培養(yǎng)效果及合適的使用量，均應(yīng)通過(guò)培養(yǎng)試驗(yàn)，了解掌握。
無(wú)機(jī)態(tài)鐵和微量金屬元素容易形成膠體復(fù)合物和發(fā)生沉淀，不能為藻類(lèi)利用。為了防止這些元素溶膠化和沉淀的發(fā)生，保持其對(duì)藻類(lèi)的可利用態(tài)，以維持在培養(yǎng)液中的適量存在，哈特納(Hutnei，1950)首先應(yīng)用了稱(chēng)為絡(luò)合劑的化合物。邁爾(Myers，1951)在培養(yǎng)小球藻中成功地使用了EDTA。其后，在許多培養(yǎng)液配方中，都有絡(luò)合物的使用。最常用的絡(luò)合劑為乙二胺四乙酸(EDTA)，此外還有亞硝基R鹽、三價(jià)氮基三醋酸(NTA)、羥基乙基乙烯二胺三醋酸(HOEDTA)等。
絡(luò)合劑，本質(zhì)上相當(dāng)于環(huán)狀有機(jī)化合物這一類(lèi)，非常穩(wěn)定，應(yīng)用一定數(shù)量的絡(luò)合劑，可以防止鐵和微量元素的沉淀和溶膠化，并能根據(jù)質(zhì)量作用定律釋放出足量的離子供藻類(lèi)細(xì)胞利用，能夠大大地減少對(duì)藻類(lèi)供應(yīng)適量鐵和微量元素的困難，并能使元素的量達(dá)到比藻類(lèi)所能忍受的較高的濃度。
但也有關(guān)于應(yīng)用絡(luò)合劑后，引起某些金屬元素缺乏的報(bào)道(M．R．Droop，1969)。
植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑又稱(chēng)植物生長(zhǎng)激素，有促進(jìn)藻類(lèi)細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖的作用。在培養(yǎng)液中加入某些植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，增產(chǎn)效果明顯。向曙光等(1986；1989)在亞心形扁藻的培養(yǎng)液中加入30～50mg/L增產(chǎn)靈，凈增產(chǎn)率為60％～70％。又加入40rng／L乙烯利，凈增產(chǎn)率為56％[87]。徐淑鳳等(1987)培養(yǎng)底棲硅藻，在培養(yǎng)液中添加0.5mg／L的a-夸乙酸鈉，對(duì)底棲硅藻的生長(zhǎng)繁殖具有明顯的促進(jìn)作用[85]。
在培養(yǎng)液中加入緩沖劑，可加強(qiáng)緩沖作用。常用的緩沖劑有三羥甲基氨基甲烷和二甘氨酸。
以上介紹了培養(yǎng)液的成分，共七類(lèi)。但不是說(shuō)單胞藻培養(yǎng)液都必須具備這七類(lèi)成分。其中最重要而且是必不可少的是大量元素，其次是微量元素和輔助生長(zhǎng)有機(jī)物質(zhì)，其他成分只在某些培養(yǎng)液配方中使用其中的一類(lèi)或兩類(lèi)。
The post 培養(yǎng)液成分 first appeared on 上海光語(yǔ)生物科技有限公司.]]>| NaHCO3 | 4g | FeCl3(0.1%溶液) | 0.2ml |
| NH2CONH2 | 0.25g | ||
| KH2PO4 | 0.05g | 海水 | 1000ml |
室內(nèi)小水體培養(yǎng)螺旋藻使用。
| NaHCO3 | 2~4g | FeCl3(0.1%溶液) | 0.2ml |
| NH2CONH2 | 0.214g | ||
| KH2PO4 | 0.042g | 海水 | 1000ml |
室外大面積培養(yǎng)螺旋藻使用。
The post M-ssl培養(yǎng)液 first appeared on 上海光語(yǔ)生物科技有限公司.]]>| NaHCO3 | 4.5g | MgSO4 | 0.2g |
| NaNO3 | 1.5g | CaCl2 | 0.04g |
| K2HPO4 | 0.5g | FeSO4 | 0.01g |
| K2SO4 | 1.0g | ||
| NaCl | 1.0g | 淡水 | 1000ml |
培養(yǎng)螺旋藻使用。
The post CFTRI培養(yǎng)液（螺旋藻培養(yǎng)基） first appeared on 上海光語(yǔ)生物科技有限公司.]]>| KNO3 | 2.02g | K2HPO4 | 0.35g |
| MgSO4·7H2O | 2.46g | A8（參考第70頁(yè)） | 3.0ml |
| NaCl | 2.30g | ||
| CaCl2 | 0.07g | 純水 | 1000ml |
培養(yǎng)一般藍(lán)藻用。
The post B.G.M.培養(yǎng)液 first appeared on 上海光語(yǔ)生物科技有限公司.]]>| Ca(NO3)2 | 0.8g | Na2SiO3 | 0.025g |
| K2HPO4 | 0.01g | FeC6H5O7 | 0.0008g |
| MgSO4·7H2O | 0.025g | 土壤抽出液Ⅰ | 20ml |
| Na2CO3 | 0.02g | 純水 | 1000ml |
培養(yǎng)舟形藻(Nauicula?pelliculosa使用)。
The post 福格(Fogg)培養(yǎng)液 first appeared on 上海光語(yǔ)生物科技有限公司.]]>| NH4NO3 | 120mg | Na2SiO3 | 100mg |
| MgSO4·7H2O | 70mg | CaCl2 | 20mg |
| K2HPO4 | 40mg | NaCl | 10mg |
| KH2PO4 | 80mg | FeC6H5O7 | 5mg |
| MnSO4 | 2mg | 淡水 | 1000ml |
培養(yǎng)泉生偏縫藻（Nitzschia?fonticola?Grun.），椿狀偏縫藻（Nitzschia?palea?Smith）,雙尖菱板藻（Hantzschia?amphioxys?Grun.），梅尼小環(huán)藻（Cyclotellameneghiniana?Kutz.）使用。
②水生硅2號(hào)培養(yǎng)液（水生生物研究所藻類(lèi)研究室藻類(lèi)應(yīng)用組[76]，1975）：
| NH2CONH2 | 150mg | NaHCO3 | 100mg |
| 過(guò)磷酸鈣[Ca(H2PO4)2·H2O+2（CaSO4·H2O | 50mg | MnSO4 | 3mg |
| MgSO4·7H2O | 50mg | EDTA-Fe | 1ml |
| KCl | 30mg | 土壤抽出液Ⅳ（參考第60頁(yè)） | 4ml |
| Na2SiO3 | 100mg | 淡水 | 1000ml |
培養(yǎng)種類(lèi)同水生硅1號(hào)，大量培養(yǎng)使用。
The post 水生硅藻培養(yǎng)液 first appeared on 上海光語(yǔ)生物科技有限公司.]]>| NH2CONH2(尿素) | 0.133g | FeSO4(1%溶液) | 0.200ml |
| H3PO4 | 0.033ml | CaCl2 | 0.030g |
| MgSO4·7H2O | 0.100g | 土壤抽出液Ⅳ（參考第60頁(yè)） | 0.500ml |
| NaHCO3 | 0.100g | ||
| KCl | 0.033g | 淡水 | 1000ml |
培養(yǎng)種類(lèi)同水生4號(hào)，使用水生6號(hào)培養(yǎng)液培養(yǎng)，藻細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖比使用水生4號(hào)迅速。
The post 水生6號(hào)培養(yǎng)液 first appeared on 上海光語(yǔ)生物科技有限公司.]]>